PCR實驗室可以是分散形式,也可以是組合形式。完成一組PCR實驗,通常應經(jīng)過試劑配制、樣品處理、核酸擴增及產物分析四個實驗過程,若實驗工藝需要,還應增加樣品粉碎過程。
一、 分散形式PCR實驗室
所謂分散形式PCR實驗室,是指完成上述實驗過程的實驗用房彼此相距較遠,呈分散布置形式。對于這種布置形式的PCR實驗室,由于各個實驗之間不易相互干擾,因此無需特殊條件要求。
二、 組合形式PCR實驗室
所謂組合形式PCR實驗室, 是指完成PCR四個實驗過程的實驗用房相鄰布置,組成獨立實驗區(qū)域的形式。對于組合形式PCR實驗室,由于各個實驗間集中布置,容易造成相互干擾,因此,對總體布局以及屏障系統(tǒng)具有一定的要求。各室在入口處設緩沖間,以減少室內外空氣交換。試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓,以防外界含核酸氣溶膠的空氣進入,造成污染;核酸擴增室及產物分析室應呈微負壓,以防含核酸的氣溶膠擴散出去污染試劑與樣品。 如果使用熒光PCR儀,擴增室和產物分析室可以合并。
若房間進深允許,可設PCR內部專用走廊。需要指出的是在減少室內外空氣交換方面,緩沖間比專用走廊更有意義。
PCR實驗區(qū)的設置,幾個要注意的問題:
1、幾個區(qū)域的大小設置情況,應該是試劑準備區(qū)、產物擴增區(qū)、擴增分析區(qū),要小一些。標本制備區(qū)應大一些。因為,標本制備室要放置一個生物安全柜為一個低溫冰箱。
2、試劑準備區(qū)、標本制備區(qū)就設立緊急洗眼器,以備不時之需。
3、PCR實驗室的潔凈度可以根據(jù)用戶的實際使用情況和資金的投入來設計。
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